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                “天生反骨”的难表♀达蛋白质如何攻略?汉腾生物DTEasy难表达⊙蛋白平台全面解决痛点!

                发布日期:2023-11-28

                俗话说,巧妇难为无米之炊。再精妙的技术,缺乏“原材料”也举步维艰。在生物制药领域,难表达蛋白就是这样一个“天生反骨的存【在”,由于它的产量低,很多独具潜力的分子止步于早研阶段。汉腾□生物开发了针对难表达蛋白(Difficult to express protein)的DTEasy工具箱全面解决难表达蛋白的痛点,助力生物制药产业突破瓶颈,气决泉达。


                在生物制药领域,表达和生产一些难表达的蛋白质,如部分单克隆抗体、细胞因子、血液因子、酶、膜¤蛋白以及复杂结构改造抗体等,一直是个巨大的挑战


                难表达蛋白产量低的原因


                1、难折叠、结构不稳定或高疏水性


                对☆于以下几种类型:

                • 分子量过大、富含二硫键的蛋①白复合物

                • 需要复杂糖基化修饰的蛋白

                • 膜蛋白、金属蛋白、部分细胞因子等疏水性较高或需要特定配体来稳定其结构的蛋白

                常常难以正确折叠或保持稳态结构,容易在细胞内形成聚集物,引发蛋白※降解及细胞凋亡。

                单抗中也有部分亚类产量较低(低于1g/L),主要由于抗体的重链和轻链的种系或互补决定区的序列问↑题,导致复合█物不能有效组装,形成错误折叠或聚集。

                2、细胞毒性


                蛋白酶和凝血酶的毒性功能在过表达时引发细胞凋亡,导致难以重组表达。



                由于难表达蛋白◤质产量受限,很多独具潜力的分子由于可开发性限制止步于早研阶段,非常可惜!


                为解决生物制药产业长期以来的“沉疴宿疾”,汉腾生物开发了DTEasy难表达蛋白平台,通过集成并优化表达过程中的各个关键阶段,成功提高╳难表达蛋白的产量。


                汉腾生物 DTEasy工具箱

                复合策略系统解决难表达蛋白的痛点


                汉腾生物开发了针对难表达蛋白(Difficult to express protein)的DTEasy工具箱,通过分子改良、专有载体、优选宿主细胞系以及定★制化工艺,全面提升难表达蛋白▲产量。


                1

                分子改良:

                改造序列,提升蛋白稳定性


                基于序列分析和蛋白结▽构预测,通过引入突变或优化氨基酸序列,改善蛋白的三维结构,提高其热稳定性。


                在项目中,我们通过序列风▓险分析和点突变,成功将细胞池产量提高到原来的7.6倍,且未引起活性改变。




                ▲来源:汉腾生△物内部研究数据◤


                2

                专有载体:

                优化载体,提高蛋白合成效率


                通◎过转录组差异表达分析,将与●难表达蛋白产量正相关的顺式作用元件插入到载体中,对不同类型重组@蛋白有100%-400%产量提升。



                ▲来源:汉腾▼生物内部研究数据


                3

                最佳宿主细胞系选择:

                挑选适配宿主,实现高╳效表达


                汉腾独家GlycoExpress人类髓系来源细胞系,专门用于表达困难的糖蛋白。在GPCR类、血液因子、复杂多聚物∩等重组蛋白表达中,具有更高的产量和与人类天然蛋白更相似的糖谱≡。




                ▲来源:汉腾生物内部研究数据


                4

                定制化工艺:

                专有添加剂,最高实现产量▽3倍提升


                对于培养过程中对细胞产生一定压力的蛋白,通过添加剂增加细胞●耐受也可以提升表达量。DTEasy专有添加剂可只需在︻培养过程中简单的单次∑添加,即可最高提升3倍表达量。



                ▲来源:汉腾生物内部研究数据


                综上,汉腾DTEasy平台通过分子设计、载体优化、优选宿主细胞系以及定制工艺,多管齐下,解决不同类型蛋白的难表达问题。可帮助客户释放高价值但传统上难以表达的●蛋白质的生产潜力,加快开发进度,提供设计选择的灵活性,并最终扩大患者获得创新生物@制品的机会。


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